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分子生物学工具酶 >DNA Polymerase I (E.coli)
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货号

规格

浓度

价格

#M0031

500 U

10,000 U/ml

250.00

#M0032

2,500 U

10,000 U/ml

1000.00

概述:
 
DNA聚合酶I是依赖于DNADNA聚合酶,具有3´→5´5´→3´核酸外切酶活性(1)。该酶的5´→3´外切酶活性能够切除位于延伸链前端的核苷酸,从而使切刻平移成为可能。
 
来源:
 
重组E. coli菌株,携带有高表达的polA基因。
 
应用:
 
1. DNA的切刻平移,制备具有高比活性的探针(2)
2. cDNA的第二条链的合成(3,4)
 
反应条件:
 
1× DNA聚合酶I反应体系含:1× DNA聚合酶I反应缓冲液 [10 mM Tris-HCl (pH 7.9 @ 25°C),50 mM NaCl,10 mM MgCl2,1 mM DTT],加入dNTPs (不随酶提供),37°C温育。
 
质量检测:
 
核酸内切酶活性:50 µl反应体系中,25 U本酶与1 µgpUC19质粒于37°C温育4小时,<10%pUC19质粒由超螺旋变为缺刻状态。 
 
质保声明:
 
DNA聚合酶I经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。
 
单位定义:
 
1单位指37°C条件下,30分钟内能催化10 nmoldNTPs掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量。
 
热失活:
 
65°C温育10分钟即可失活。
 
参考文献:
 
1. Lehman, I.R. (1981). In P.D. Boyer (Ed.), The Enzymes Vol. 14A, (p. 16-38). San Diego: Academic Press.
2. Meinkoth, J. and Wahl, G.M. (1987). Methods Enzymology, 152, 91-94.
3. Gubler, U. and Hoffmann, B.J. (1983). Gene, 25, 263-269.
4. D‘ Alessio, J.M. and Gerard, G.F. (1988). Nucleic Acids Res., 16, 1999-2014.
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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