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分子生物学工具酶 >Pfu DNA Polymerase
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货号

规格

浓度

价格

#M0011

100 U

2,500 U/ml

120.00

#M0012

500 U

2,500 U/ml

480.00

概述:
 
Pfu DNA聚合酶是从克隆有Pyrococcus furiosus DNA聚合酶基因的大肠杆菌中分离出来的。Pfu DNA聚合酶有3´→5´外切酶的活性,它能纠正DNA扩增过程中产生的错误,是目前已发现的所有天然耐热DNA聚合酶中出错率最低的(1)
 
来源:
E.coli菌株,包含有从Pyrococcus furiosus中克隆的基因(2)
 
应用:
 
1. 常规PCR
2. 基因的高保真PCR,克隆和表达。
3. 反转录PCR (RT-PCR)
4. 平末端PCR克隆。
5. 定点突变。
 
反应条件:
 
10× Pfu DNA聚合酶反应缓冲液 (包括 20 mM MgSO4) [200 mM Tris-HCl (pH 8.8 @ 25°C),100 mM (NH4)2SO4,100 mM KCl,1 mg/ml无核酸酶活性的BSA,1% Triton X-100  (V/V),20 mM MgSO4]。
 
质量检测:
 
核酸外切酶活性:在50 µl反应体系中,10 U本酶与0.2 mM dNTPs1 µgHind III消化的λDNA37°C温育4小时,电泳条带无明显变化。
核酸内切酶活性:在50 µl反应体系中,10 U本酶与0.2 mM dNTPs1 µgpUC19质粒于37°C温育4小时,电泳条带无明显变化。
纯度:经SDS-PAGE (考马斯亮蓝染色) 检测其纯度大于95%
 
质保声明:
 
Pfu DNA聚合酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。
 
单位定义:
 
72°C下反应30分钟,能催化10 nmoldNTPs聚合为多核苷酸片段的酶量定义为1个活性单位 (U)
 
参考文献:
 
1. Lunberg, K.S. et al. 1991. High-fidelity amplification using a thermostable DNA polymerase isolated from Pyrococcus furiosus. Gene. 108:1-6.
2. Sambrook, J. et al. 2001. Molecular Cloning: A Laboratory Manual, (3rd ed.), Cold Spring Harbor Laboratory Press.
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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